

La cromatografía es un método de separación y análisis, y la separación es el núcleo. Por lo tanto, la columna cromatográfica que es responsable de la separación es el corazón del sistema cromatográfico. Los requisitos para las columnas cromatográficas son alta eficiencia de columna, buena selectividad y velocidad de análisis rápida.Diversos rellenos particulados para HPLC, como gel de sílice poroso y fases unidas basadas en gel de sílice, alúmina, microesferas de polímero orgánico (incluidas resinas de intercambio iónico), carbono poroso, etc., generalmente tienen tamaños de partícula de 3, 5, 7, 10 μm, etc., y la eficiencia teórica de la columna puede alcanzar de 50,000 a 160,000/m. Para análisis generales, solo se necesitan 5,000 platos teóricos de eficiencia de columna; para análisis homólogos, solo se necesitan 500; para pares de sustancias más difíciles de separar, se pueden usar columnas de hasta 20,000 platos teóricos, por lo que generalmente una longitud de columna de aproximadamente 10 a 30 cm puede satisfacer las necesidades del análisis de mezclas complejas.
Las columnas cromatográficas se pueden dividir en dos categorías: columnas empaquetadas y columnas de tubo abierto. La mayoría están hechas de metal o vidrio. Hay tubos rectos, serpentines,Tubo en forma de U, etc. La cromatografía líquida suele utilizar columnas empaquetadas.
El efecto de separación de la columna cromatográfica depende de la fase estacionaria seleccionada, así como de las condiciones de preparación y operación de la columna cromatográfica.
La eficiencia de la columna se ve afectada por factores dentro y fuera de la columna. Para lograr una alta eficiencia de la columna cromatográfica, además del pequeño volumen muerto fuera de la columna, también se requieren una estructura de columna razonable (minimizando el volumen muerto fuera del lecho empacado tanto como sea posible) y tecnología de relleno. Incluso con la mejor tecnología de relleno, las condiciones de relleno en el centro de la columna y a lo largo de la pared del tubo siempre son diferentes. El área cercana a la pared del tubo es relativamente suelta, propensa a la canalización y tiene una velocidad de flujo más rápida, lo que afecta la forma del flujo del eluyente y ensancha el espectro. Este es el efecto de la pared del tubo. Esta área de la pared del tubo se mide aproximadamente desde la pared del tubo hacia el interior.El espesor es 30 veces el diámetro de partícula. En los sistemas de cromatografía líquida generales, la influencia del efecto extracolumna en la eficiencia de la columna es mucho mayor que la del efecto de pared del tubo.
Guardar Operación
1. Si la fase móvil contiene ácido o sal inorgánica, debe enjuagarse primero con agua desionizada (20 veces el volumen de la columna). Luego use acetonitrilo o metanol para almacenar la columna cromatográfica. Selle la unión de la columna y almacénela en un ambiente estable.
2. Evite el impacto mecánico directo o la caída de la columna cromatográfica para evitar la degradación de su rendimiento.
















